Tiêu chuẩn quốc gia TCVN 11480:2016 quy định phương pháp xác định dư lượng thuốc bảo vệ thực vật trong nước uống bằng phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao sử dụng detector tử ngoại (HPLC-UV). Đây là tài liệu kỹ thuật quan trọng giúp các phòng thử nghiệm kiểm soát chất lượng nước uống, bảo vệ sức khỏe cộng đồng trước nguy cơ ô nhiễm hóa chất bảo vệ thực vật.
- Phạm vi áp dụng của tiêu chuẩn (Điều 1)
- Tiêu chuẩn này quy định phương pháp xác định dư lượng của một số loại thuốc bảo vệ thực vật cụ thể trong các mẫu nước uống.
- Phương pháp này áp dụng cho việc phân tích định lượng các hoạt chất thuốc bảo vệ thực vật có khả năng hấp thụ bức xạ tử ngoại và có thể tách được bằng hệ thống sắc ký lỏng pha đảo.
- Giới hạn phát hiện của phương pháp phụ thuộc vào bản chất của từng hoạt chất, thể tích mẫu nước được chiết và hiệu năng của hệ thống thiết bị sắc ký lỏng sử dụng detector UV.
- Tài liệu viện dẫn liên quan (Điều 2)
- Các tài liệu viện dẫn trong tiêu chuẩn là nền tảng để thực hiện đúng quy trình lấy mẫu và chuẩn bị mẫu thử nghiệm.
- Tiêu chuẩn viện dẫn chủ yếu bao gồm các tiêu chuẩn quốc gia (TCVN) và tiêu chuẩn quốc tế (ISO) về hướng dẫn lấy mẫu nước, bảo quản mẫu nước uống và các yêu cầu chung về năng lực phòng thử nghiệm hóa học.
- Việc áp dụng phiên bản mới nhất của các tài liệu viện dẫn là bắt buộc để đảm bảo tính cập nhật và độ chính xác của phép thử.
- Nguyên tắc của phương pháp sắc ký lỏng detector UV (Điều 3)
- Quá trình chiết tách: Các hoạt chất thuốc bảo vệ thực vật có trong mẫu nước uống được làm giàu và tách ra khỏi nền mẫu bằng phương pháp chiết lỏng - lỏng (LLE) sử dụng dung môi hữu cơ không phân cực hoặc phương pháp chiết pha rắn (SPE) với cột chiết thích hợp.
- Quá trình làm sạch và cô đặc: Dịch chiết sau đó được làm khô bằng chất hút nước (như natri sunfat khan), cô đặc bằng thiết bị cô quay chân không hoặc thổi dòng khí nitơ để chuyển sang dung môi phù hợp cho phân tích sắc ký.
- Phân tích sắc ký: Dịch chiết cô đặc được tiêm vào hệ thống sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC). Các chất được tách nhau ra trên cột sắc ký pha đảo (thường là cột C18) dựa trên sự khác biệt về ái lực giữa pha động và pha tĩnh.
- Phát hiện và định lượng: Các hoạt chất sau khi tách khỏi cột được phát hiện bằng detector tử ngoại (UV) hoặc detector mảng diod (DAD) ở bước sóng hấp thụ cực đại đặc trưng. Định lượng hàm lượng chất dựa trên việc so sánh diện tích pic hoặc chiều cao pic của mẫu với dung dịch chuẩn tương ứng.
- Yêu cầu về thuốc thử và vật liệu thử nghiệm (Điều 4)
- Yêu cầu chung: Tất cả các hóa chất, dung môi sử dụng phải thuộc loại tinh khiết phân tích dùng cho sắc ký (HPLC grade) để tránh gây nhiễu đường nền hoặc tạo các pic giả trên sắc ký đồ.
- Nước cất siêu tinh khiết: Nước dùng để pha chế pha động và dung dịch chuẩn phải là nước siêu tinh khiết, không chứa các tạp chất hữu cơ có khả năng hấp thụ UV.
- Dung môi hữu cơ: Bao gồm axetonitril (ACN), metanol (MeOH), diclometan, etyl axetat và các dung môi khác phù hợp với quy trình chiết và rửa giải.
- Chất chuẩn thuốc bảo vệ thực vật: Các chất chuẩn tinh khiết của từng loại thuốc bảo vệ thực vật cần phân tích, có chứng nhận xuất xứ và độ tinh khiết rõ ràng (thường lớn hơn 95%).
- Dung dịch chuẩn gốc và chuẩn làm việc: Được pha chế trong dung môi thích hợp, bảo quản ở nhiệt độ lạnh (thường dưới 4 độ C hoặc âm sâu) và tránh ánh sáng trực tiếp để ngăn ngừa sự phân hủy của hoạt chất.
- Các hóa chất bổ trợ khác: Natri sunfat khan (để làm khô dịch chiết), các chất điều chỉnh pH (axit photphoric, axit axetic, amoni axetat) dùng để tối ưu hóa pha động trong quá trình sắc ký.
NƯỚC UỐNG - XÁC ĐỊNH DƯ LƯỢNG THUỐC BẢO VỆ THỰC VẬT - PHƯƠNG PHÁP SẮC KÝ LỎNG SỬ DỤNG DETECTOR UV
Drinking water - Determination of pesticides residues - Liquid chromatographic method with ultravilolet detector
Lời nói đầu
TCVN 11480:2016 được xây dựng trên cơ sở tham khảo AOAC 992.14 Pesticides in finished drinking water. Liquid chromatographic method with ultraviolet detector,
TCVN 11480:2016 do Ban kỹ thuật tiêu chuẩn quốc gia TCVN/TC/F9 Đồ uống biên soạn, Tổng cục Tiêu chuẩn Đo lường Chất lượng thẩm định, Bộ Khoa học và Công nghệ công bố.
NƯỚC UỐNG - XÁC ĐỊNH DƯ LƯỢNG THUỐC BẢO VỆ THỰC VẬT - PHƯƠNG PHÁP SẮC KÝ LỎNG SỬ DỤNG DETECTOR UV
Drinking water - Determination of pesticides residues - Liquid chromatographic method with ultravilolet detector
Tiêu chuẩn này quy định phương pháp sắc ký lỏng sử dụng detector UV để xác định 18 loại thuốc bảo vệ thực vật và các chất chuyển hóa có dải nồng độ trung bình thấp (cỡ nanogam trên mililit) trong nước uống.
Các kết quả của phép thử liên phòng thử nghiệm được nêu trong Phụ lục B.
Chiết lượng mẫu xác định với diclometan bằng cách lắc trong phễu chiết hoặc lắc trong chai trộn, sử dụng máy lắc cơ học. Dịch chiết diclometan được tách riêng, làm khô bằng natri sulfat khan, được cô cạn và hòa tan bằng metanol. Các dư lượng thuốc bảo vệ thực vật được tách ra và được đo bằng sắc ký lỏng sử dụng detector UV.
Chỉ sử dụng các thuốc thử tinh khiết phân tích và nước cất hai lần không chứa các chất nhiễm bẩn có thể làm cản trở quá trình xác định các chất cần phân tích, trừ khi có quy định khác. Các dung môi được chưng cất trong dụng cụ thủy tinh hoặc loại tương đương.
3.1 Diclometan (metylen clorua, CH2CI2).
3.2 Hexan.
3.3 Metanol.
3.4 Natri sulfat (Na2SO4) khan, dạng hạt
Nung natri sulfat trong đĩa ở nhiệt độ 450 °C trên 4 h để loại bỏ các hợp chất hữu cơ gây nhiễu.
3.5 Natri clorua (NaCI), dạng tinh thể
Nung natri clorua trong đĩa ở nhiệt độ 450 °C trên 4 h để loại bỏ các hợp chất hữu cơ gây nhiễu.
3.6 Dung dịch đệm phosphat, pH = 7
Trộn 29,6 ml dung dịch axit clohydric 0,1 M với 50 ml dung dịch dikali hydro phosphat (K2HPO4) 0,1 M.
3.7 Dung dịch axit phosphoric (H3PO4), 0,1% (khối lượng).
3.8 Dung dịch bảo quản, dung dịch thủy ngân (II) clorua (HgCI2) trong nước, 10 mg/ml.
CẢNH BÁO - Thủy ngân (II) clorua là chất độc và có khả năng gây ung thư. Cần mang thiết bị bảo vệ thích hợp để tránh hít phải hoặc hấp thụ qua da.
3.9 Dung dịch chuẩn gốc
Sử dụng các chất chuẩn có độ tinh khiết lớn hơn 96% để chuẩn bị dung dịch chuẩn gốc thuốc bảo vệ thực vật có nồng độ 1 mg/ml trong metanol. Có thể sử dụng các dung dịch chuẩn gốc đã được chuẩn bị sẵn ở nồng độ bất kỳ nếu các dung dịch này đã được chứng nhận. Bảo quản các dung dịch này ở nhiệt độ phòng trong các lọ có nắp vặn đậy kín bằng TFE-fluorocarbon và tránh ánh sáng. Không sử dụng các dung dịch chuẩn gốc sau khi chuẩn bị hai tháng hoặc khi có dấu hiệu suy giảm chất lượng.
3.10 Dung dịch chuẩn nội, etylbenzen trong metanol, nồng độ 2,0 mg/ml
Chuẩn bị dung dịch từ etylbenzen có độ tinh khiết lớn hơn 98%.
3.11 Dung dịch thay thế, carbazol trong metanol, nồng độ 0,1 mg/ml
Chuẩn bị dung dịch từ carbazol có độ tinh khiết lớn hơn 98%. Bảo quản dung dịch thay thế trong chai có nắp vặn đậy kín bằng TFE-fluorocarbon ở nhiệt độ phòng.
Sử dụng các thiết bị, dụng cụ thông thường của phòng thử nghiệm và cụ thể như sau:
4.1 Chai đựng mẫu, bằng thủy tinh borosilicat, dung tích 1 lít, có nắp vặn được lót tetrafluoroetylen (TFE)-fluorocarbon. Ngâm miếng lót qua đêm trong metanol trước khi dùng.
4.2 Phễu chiết, bằng thủy tinh borosilicat, dung tích 2 lít, có van khóa bằng TFE-fluorocarbon và có nắp thủy tinh mài hoặc có lớp lót bằng TFE-fluorocarbon.
4.3 Chai trộn, bằng thủy tinh borosilicat khả năng chiết thấp, dung tích 1,7 lít, có nắp vặn được lót TFE-fluorocarbon. Cắt miếng TFE-fluorocarbon vừa với nắp. Ngâm miếng lót qua đêm trong metanol trước khi dùng.
4.4 Bình nón, bằng thủy tinh borosilicat, dung tích 500 ml.
4.5 Cột khô, dài 400 mm x đường kính trong 19 mm, có đĩa thủy tinh xốp.
4.6 Bộ làm bay hơi dung môi Kuderna-Danish, gồm có:
4.6.1 Ống cô đặc, bằng thủy tinh borosilicat, dung tích 10 ml hoặc 25 ml, được chia vạch, dạng côn chuẩn khớp nối cỡ 19/22. Kiểm tra việc hiệu chuẩn ống này với các thể tích được sử dụng. Dùng nút thủy tinh mài để tránh làm bay hơi dịch chiết.
4.6.2 Bình làm bay hơi, bằng thủy tinh borosilicate, dung tích 500 ml, cổ dạng côn chuẩn khớp nối cỡ 20/40, đáy dạng côn chuẩn khớp nối cỡ 19/22, bình được lắp kín với ống cô đặc (4.4.1) bằng lò xo.
4.6.3 Cột Snyder, loại 3 bi macro, dài 218 mm, dạng côn chuẩn khớp nối cỡ 24/40 và loại 2 bi micro, dài 170 mm, dạng côn chuẩn khớp nối cỡ 19/22.
4.7 Lọ (vial), bằng thủy tinh, dung tích từ 5 ml đến 10 ml, nắp vặn có lót TFE-fluorocarbon.
4.8 Xyranh, dùng một lần, bằng thủy tinh, đầu tip được để đông lạnh, dung tích 2,5 ml.
4.9 Máy lắc phễu chiết, có thể giữ phễu chiết 2 lít (4.2) và lắc phễu theo chuyển động tròn để trộn đều các lượng chứa trong phễu.
4.10 Bộ trộn, có thể giữ các chai trộn ở tốc độ 30 r/min.
4.11 Hạt đun sôi, carborundum, cỡ hạt No.12, được nung 30 min ở 400 °C trước khi sử dụng. Làm nguội và bảo quản trong bình hút ẩm.
4.12 Nồi cách thủy, có thể duy trì nhiệt độ từ 18 °C đến 21°C, dao động ± 2 °C, sử dụng trong tủ hút.
4.13 Cân phân tích, có thể cân chính xác đến 0,000 1 g.
4.14 Bộ lọc macro
4.14.1 Màng lọc cellulose axetat, đường kính 47 mm, không chia ô, dùng cho pha nước.
4.14.2 Màng lọc PTFE, đường kính 47 mm, không chia ô, dùng cho pha hữu cơ.
4.15 Bộ lọc micro, gồm có xyranh (4.8) được gắn với giá đỡ. Sử dụng màng lọc PTFE cỡ lỗ 0,45 μm, diện tích lọc 0,2 cm2.
4.16 Hệ thống sắc ký lỏng (LC)
4.16.1 Xyranh áp lực cao hoặc vòng bơm mẫu, có thể bơm từ 10 μl đến 100 μl.
4.16.2 Cột phân tích.
4.16.2.1 Cột ban đầu, dài 250 mm x đường kính trong 4,6 mm, bằng thép không gỉ được nhồi ODS cỡ hạt 5 μm.
4.16.2.2 Cột khẳng định, dài 250 mm x đường kính trong 4,6 mm, bằng thép không gỉ được nhồi silica cỡ hạt 5 μm.
4.16.3 Hệ thống bơm gradient, có tốc độ dòng không đổi.
4.16.4 Detector UV, có thể đo được ở bước sóng 254 nm.
4.16.5 Bộ ghi đồ thị.
4.17 Bình định mức, dung tích 10 ml và 100 ml.
4.18 Ống đong, được chia vạch, dung tích 1 000 ml.
Mẫu gửi đến phòng thử nghiệm phải đúng là mẫu đại diện. Mẫu không bị hư hỏng hoặc không bị thay đổi trong suốt quá trình vận chuyển hoặc bảo quản.
Việc lấy mẫu không quy định trong tiêu chuẩn này. Các bên liên quan tự thỏa thuận về việc lấy mẫu.
6.1 Lấy mẫu phòng thử nghiệm
Cho 1 ml dung dịch bảo quản (3.8) vào chai đựng mẫu (4.1). Lấy 1 lít mẫu phòng thử nghiệm cho vào chai, đậy nắp và lắc mạnh trong 1 min. Làm lạnh mẫu ở nhiệt độ 4 °C từ khi lấy mẫu cho đến khi chiết, tránh ánh sáng. Chiết mẫu trong vòng 28 ngày sau khi lấy mẫu.
6.2 Chuẩn bị mẫu
6.2.1 Quy trình chiết tự động
Cho dung dịch bảo quản (3.8) vào các mẫu phòng thử nghiệm chưa bổ sung chất bảo quản. Đánh dấu mức nước trên thành chai đựng mẫu để dùng cho phép xác định thể tích mẫu tiếp theo. Thêm 50 μl dung dịch thay thế (3.11) vào mẫu phòng thử nghiệm trước khi chiết để có nồng độ dung dịch thay thế trong mẫu thử là 5,0 μg/l và trong dịch chiết là 1,0 μg/ml. Nếu sử dụng máy lắc phễu chiết cơ học (4.9) thì rót toàn bộ mẫu vào phễu chiết (4.2). Nếu dùng bộ trộn cơ học (4.10) thì rót toàn bộ mẫu vào chai trộn (4.3). Thêm 50 ml dung dịch đệm phosphat (3.6). Kiểm tra pH của dung dịch bằng giấy pH và chỉnh đến pH 7 bằng cách thêm dung dịch axit sulfuric loãng hoặc dung dịch natri hydroxit loãng, nếu cần.
Cho 100 g natri clorua (3.5) vào phần mẫu thử, đậy kín và lắc để hòa tan muối. Thêm 300 ml diclometan (3.1) vào chai đựng mẫu rỗng, đậy kín và lắc 30 s để tráng chai. Chuyển nước tráng vào dung dịch mẫu thử đựng trong phễu chiết hoặc chai trộn, đậy kín và lắc 10 s, xả khí thường xuyên. Lặp lại quá trình lắc và xả khí cho đến khi không quan sát thấy áp suất thoát ra trong khi xả khí. Đậy kín và đặt vật chứa phần mẫu thử vào thiết bị trộn cơ học thích hợp (máy lắc phễu chiết hoặc bộ trộn). Lắc hoặc trộn 1 h. Dừng lại và quan sát hỗn hợp pha nước và pha hữu cơ đã trộn kỹ trong 2 min.
Sau khi chiết, rót lượng chứa trong chai trộn vào phễu chiết 2 lít (4.2). Để yên 10 min cho tách lớp. Nếu phần nhũ tương trung gian giữa các lớp lớn hơn một phần ba thể tích lớp dung môi thì kết thúc quá trình tách pha bằng các phương pháp cơ học như khuấy, lọc phần nhũ tương qua bông thủy tinh hoặc ly tâm. Thu dịch chiết diclometan (lớp phía dưới) vào bình nón 500 ml (4.4) chứa khoảng 5 g natri sulfat (3.4) khan. Xoay bình nón để làm khô dịch chiết. Để yên trong 15 min.
Xác định thể tích mẫu phòng thử nghiệm ban đầu bằng cách thêm nước đến vạch vào chai đựng mẫu rồi chuyển vào ống đong chia vạch 1 000 ml (4.18). Ghi lại thể tích mẫu phòng thử nghiệm, chính xác đến 5 ml.
6.2.2 Quy trình chiết thủ công
Cho dung dịch bảo quản (3.8) vào các mẫu phòng thử nghiệm chưa bổ sung chất bảo quản. Đánh dấu mức nước trên thành chai để dùng cho phép xác định thể tích mẫu tiếp theo. Rót toàn bộ mẫu vào phễu chiết 2 lít (4.2) và thêm 50 μl dung dịch thay thế (3.11) vào 1 lít mẫu trước khi chiết (để nồng độ dung dịch thay thế trong mẫu thử là 5,0 μg/l, trong dịch chiết là 1,0 μg/ml). Thêm 50 ml dung dịch đệm phosphat (3.6). Kiểm tra pH của dung dịch bằng giấy pH và chỉnh đến pH 7 bằng cách thêm dung dịch axit sulfuric loãng hoặc dung dịch natri hydroxit loãng, nếu cần.
Cho 100 g natri clorua (3.5) vào phần mẫu thử, đậy kín và lắc để hòa tan muối. Thêm 60 ml diclometan (3.1) vào chai đựng mẫu phòng thử nghiệm, đậy kín và lắc 30 s để tráng chai. Chuyển nước tráng vào dung dịch mẫu thử đựng trong phễu chiết. Chiết dung dịch mẫu thử bằng cách lắc mạnh phễu trong 2 min đồng thời xả khí thường xuyên để giải phóng áp suất dư. Để yên 10 min cho tách lớp. Nếu phần nhũ tương trung gian giữa các lớp lớn hơn một phần ba thể tích lớp dung môi thì kết thúc quá trình tách pha bằng các phương pháp cơ học như khuấy, lọc phần nhũ tương qua bông thủy tinh hoặc ly tâm. Thu dịch chiết diclometan (lớp phía dưới) vào bình nón 500 ml (4.4) chứa khoảng 5 g natri sulfat (3.4) khan. Thêm 60 ml diclometan vào chai đựng mẫu phòng thử nghiệm và lặp lại các bước tráng, chuyển và chiết, sử dụng cùng phễu chiết và gộp các dịch chiết vào cùng một bình nón. Tương tự, tiến hành lần chiết thứ ba với 60 ml diclometan. Xoay bình để làm khô dịch chiết. Để yên trong 15 min.
Xác định thể tích mẫu ban đầu như trong 6.2.1.
6.3 Cô đặc dịch chiết
Lắp bộ làm bay hơi dung môi (4.6) bằng cách gắn ống cô đặc 25 ml (4.6.1) vào bình làm bay hơi 500 ml (4.6.2). Cho hỗn hợp dịch chiết (từ 6.2.1 hoặc 6.2.2) qua cột làm khô chứa khoảng 10 g natri sulfat (3.4) khan, rồi thu lấy dịch chiết vào ống cô đặc. Tráng bình nón và cột bằng 20 ml đến 30 ml diclometan (3.1) để kết thúc quá trình chuyển định lượng.
Thêm một hoặc hai hạt đun sôi (4.11) sạch vào bình làm bay hơi và gắn vào cột macro-Snyder (4.6.3). Làm ướt lại cột bằng khoảng 1 ml diclometan. Đặt bộ làm bay hơi dung môi trên nồi cách thủy (4.12) ở nhiệt độ từ 18 °C đến 21 °C sao cho một phần ống cô đặc ngập trong nước nóng và toàn bộ bề mặt xung quanh thấp hơn của bình chìm trong hơi nóng. Chỉnh vị trí của thiết bị theo phương thẳng đứng và nhiệt độ nước để kết thúc quá trình chuẩn độ trong 15 min đến 20 min. Ở tốc độ chưng cất thích hợp, các bi của cột sẽ chuyển động liên tục, nhưng các khoang sẽ không bị ngập. Khi thể tích của dung dịch đạt khoảng 2 ml, lấy bộ làm bay hơi dung môi ra khỏi nồi cách thủy, để cột ráo nước và để nguội trên 10 min.
Tháo cột macro-Snyder, tráng bình và điểm nối phía dưới bằng 1 ml đến 2 ml metanol (3.3), thu nước tráng vào ống cô đặc. Thêm từ 5 ml đến 10 ml metanol và hạt đun sôi mới. Gắn cột micro-Snyder (4.6.4) vào ống cô đặc và làm ướt lại cột bằng khoảng 0,5 ml metanol. Đặt bộ làm bay hơi có cột micro-Snyder lên nồi cách thủy sao cho một phần ống cô đặc chìm trong nước nóng. Chỉnh thiết bị theo phương thẳng đứng và nhiệt độ nước để kết thúc quá trình cô đặc trong 5 min đến 10 min. Khi thể tích dung dịch khoáng 2 ml, lấy bộ làm bay hơi dung môi ra khỏi nồi cách thủy, để cột ráo nước và để nguội. Tháo cột micro-Snyder và tráng ống cô đặc đồng thời chỉnh thể tích dung dịch đến 5,0 ml bằng metanol.
Thêm 50 μl dung dịch gốc chuẩn nội (3.10) vào dịch chiết phần mẫu thử để thu được dung dịch chuẩn nội làm việc có nồng độ 20 μg/ml. Đậy kín và lắc để phân tán chất chuẩn nội. Chuyển dịch chiết vào lọ có nắp vặn TFE-fluorocarbon kín có kích thước thích hợp. Bảo quản ở 4 °C cho đến khi phân tích. Dịch chiết có thể bền 28 ngày nếu được bảo quản trong các điều kiện này.
6.4 Xác định
Bơm dịch chiết thu được (xem 6.3) vào máy sắc kí. Các điều kiện vận hành sau đây của máy sắc ký được coi là thích hợp:
a) Điều kiện vận hành cột ban đầu:
Gradient tuyến tính từ hỗn hợp axetonitril-nước (tỷ lệ thể tích 25 : 75) với dung dịch axit phosphoric 0,1% (3.7) đến hỗn hợp axetonitril-nước (tỷ lệ thể tích 90 : 10) trong 25 min; giữ 10 min; đưa về thành phần pha ban đầu và để cân bằng 15 min;
Tốc độ dòng: 1,0 ml/min;
Thể tích bơm: 10 μl.
b) Điều kiện vận hành cột khẳng định:
Giữ pha động 5% metanol trong hỗn hợp diclometan-hexan (tỷ lệ thể tích 5 : 95) trong 3 min; gradient tuyến tính đến pha động 5% metanol trong hỗn hợp diclometan-hexan (tỷ lệ thể tích 85 : 15) trong 25 min; đưa về thành phần pha ban đầu và để cân bằng 20 min;
Tốc độ dòng: 1,0ml/min;
Thể tích bơm: 20 μl.
Các cột được bịt kín một đầu hoặc các thiết bị khác nhau có thể cần thay đổi các điều kiện thao tác để thu được độ phân giải tối đa.
6.5 Hiệu chuẩn máy sắc ký lỏng sử dụng detector UV
Các ví dụ về quá trình chiết sử dụng các điều kiện này được nêu trong Phụ lục A.
Đầu tiên, tiến hành hiệu chuẩn năm mức trong dải tuyến tính của detector UV ở bước sóng 254 nm, sử dụng dung dịch chuẩn nội và hệ số đáp ứng tương đối (RRF). RRF được tính theo Công thức (1):
|
| (1) |
Trong đó:
Ds là diện tích pic của chất chuẩn;
Dis là diện tích pic của chất chuẩn nội;
Cs là nồng độ dung dịch chuẩn;
Cis là nồng độ dung dịch chuẩn nội.
Nếu giá trị RRF đối với từng chất phân tích trong dải hiệu chuẩn là không đổi (độ lệch chuẩn tương đối RSD ≤ 10%) thì có thể sử dụng giá trị RRF trung bình để tính kết quả. Nếu không, dựng đường chuẩn của tỷ số đáp ứng của chất phân tích (Adung dịch chuẩn/Adung dịch chuẩn nội, trong đó A là diện tích hoặc chiều cao pic) theo nồng độ dung dịch chuẩn hiệu chuẩn.
Kiểm tra xác nhận đường chuẩn hoặc RRF hàng ngày bằng cách đo một hoặc hai dung dịch chuẩn hiệu chuẩn. Nếu RRF đối với chất phân tích bất kỳ chênh lệch lớn hơn ± 20% so với RRF trung bình trong phép hiệu chuẩn đầu tiên thì lặp lại phép phân tích dung dịch chuẩn một mức với dung dịch chuẩn mới. Nếu không thì chuẩn bị đường chuẩn mới.
Hàm lượng các thuốc bảo vệ thực vật có trong mẫu thử, C, biểu thị bằng microgam trên lít (μg/l), có thể được xác định từ đường chuẩn hoặc được tính theo Công thức (2):
|
| (2) |
Trong đó:
As là đáp ứng đo được đối với chất phân tích;
Ais là đáp ứng đối với chất chuẩn nội;
Is là khối lượng chất chuẩn nội thêm vào từng dịch chiết, tính bằng microgam (μg), xem 6.3;
V0 là thể tích mẫu phòng thử nghiệm dùng để chiết, tính bằng lít;
RRFtb là giá trị trung bình của các hệ số đáp ứng tương đối tính được theo Công thức (1).
Báo cáo thử nghiệm phải bao gồm ít nhất các thông tin sau:
a) mọi thông tin cần thiết để nhận biết đầy đủ mẫu thử;
b) phương pháp lấy mẫu đã sử dụng, nếu biết;
c) phương pháp thử đã sử dụng, viện dẫn tiêu chuẩn này;
d) mọi thao tác không quy định trong tiêu chuẩn này, hoặc được xem là tùy chọn, cùng với mọi tình huống bất thường có thể ảnh hưởng đến kết quả thử nghiệm;
e) kết quả thử thu được;
f) nếu kiểm tra độ lặp lại thì nêu kết quả cuối cùng thu được.
(tham khảo)
Hình A.1 - Sắc ký đồ của atrazine, diuron, fenamiphos sulfone, fenamiphos sulfoxide, metribuzin DADK, chất chuyển hóa metabolit, propanil, SWEP và etyl-benzen (chất chuẩn nội)
Hình A.2- Sắc ký đồ của of barban, carbofuran phenol, cyanazine, fluometuron, 3-ketocarbofuran phenol, linuron, metribuzin DA, metribuzin DK, neburon, propham và etyl-benzen (chất chuẩn nội)
(tham khảo)
Các kết quả nghiên cứu liên phòng thử nghiệm
Nghiên cứu cộng tác cho thấy phương pháp chấp nhận được đối với các chất phân tích: atrazin đã khử alkyl, barban, carbofuran phenol, cyanazine, diuron, fenamiphos sulfone, fenamiphos sulfoxide, fluometuron, 3-ketocarbofuran phenol, linuron, metribuzin DA, metribuzin DADK, metribuzin DK, neburon, chất chuyển hóa pronamid, propanil, propham và SWEP. Trong nước tinh khiết, metribuzin DADK và metribuzin DK cho hiệu quả chiết rất thấp (< 50%) nhưng độ chụm có thể chấp nhận được, RSDR lần lượt là 17,2% và 17,5%. Trong nước uống, giá trị RSDR của metribuzin DADK và metribuzin DK lần lượt là 29,3% và 28,8%. Xem Bảng B.1 về các kết quả của nghiên cứu liên phòng thử nghiệm đối với phương pháp.
Bảng B.1 - Các kết quả nghiên cứu liên phòng thử nghiệm đối với thuốc bảo vệ thực vật trong nước uống bằng phương pháp sắc ký lỏng sử dụng detector UV
| Chất phân tích | Nồng độ, μg/l | Độ thu hồi, % | Nước tinh khiết | Nước uống | ||||||
| sr | sR | RSDr | RSDR | sr | sR | RSDr | RSDR | |||
| Atrazine đã khử alkyl | 5,0 | 89,6 | 0,43 | 0,82 | 9,8 | 8,3 | 0,48 | 0,75 | 11,1 | 17,2 |
| Barban | 10,0 | 88,4 | 1,06 | 1,31 | 12,0 | 14,8 | 0,77 | 1,15 | 8,5 | 12,5 |
| Carbofuran phenol | 50,0 | 75,0 | 5,25 | 8,0 | 14,0 | 21,2 | 5,16 | 13,4 | 14,7 | 38,4 |
| Cyanazine | 10,0 | 91,6 | 1,13 | 1,74 | 12,4 | 19,0 | 0,85 | 1,29 | 9,3 | 14,0 |
| Diuron | 1,0 | 102 | 0,07 | 0,13 | 7,0 | 13,3 | 0,05 | 0,11 | 5,5 | 11,2 |
| Fenamiphos sulfone | 100,0 | 96,4 | 8,00 | 11,7 | 8,3 | 12,1 | 7,00 | 10,9 | 7,3 | 11,2 |
| Fenamiphos sulfoxide | 20,0 | 97,5 | 1,11 | 2,19 | 5,7 | 11,2 | 1,34 | 1,30 | 7,5 | 7,2 |
| Fluometuron | 2,0 | 88,0 | 0,21 | 0,29 | 11,9 | 17,0 | 0,21 | 0,31 | 11,7 | 17,0 |
| 3-Ketocarbofuran phenol | 5,0 | 87,6 | 0,71 | 0,83 | 16,2 | 19,0 | 0,73 | 0,93 | 18,7 | 23,8 |
| Linuron | 2,0 | 94,5 | 0,11 | 0,14 | 6,2 | 7,8 | 0,12 | 0,24 | 6,6 | 12,9 |
| Metribuzin DA | 5,0 | 81,2 | 0,66 | 0,66 | 16,4 | 16,4 | 0,36 | 1,24 | 11,2 | 38,6 |
| Metribuzin DADK | 5,0 | 23,4 | 0,19 | 0,20 | 16,4 | 17,2 | 0,12 | 0,25 | 14,3 | 29,3 |
| Metribuzin DK | 5,0 | 39,0 | 0,21 | 0,34 | 10,6 | 17,5 | 0,31 | 0,58 | 15,5 | 28,8 |
| Neburon | 2,0 | 90,5 | 0,17 | 0,20 | 9,7 | 11,0 | 0,12 | 0,24 | 7,1 | 13,3 |
| Chất chuyển hóa pronamid | 10,0 | 103 | 1,01 | 1,49 | 9,8 | 14,5 | 0,86 | 1,74 | 8,6 | 17,3 |
| Propanil | 1,0 | 98,0 | 0,08 | 0,11 | 8,5 | 11,5 | 0,08 | 0,12 | 8,7 | 13,8 |
| Propham | 10,0 | 86,3 | 1,52 | 2,08 | 17,6 | 24,1 | 0,62 | 1,09 | 7,3 | 12,8 |
| SWEP | 10,0 | 95,1 | 0,54 | 0,81 | 5,7 | 8,6 | 0,39 | 0,54 | 4,0 | 5,5 |
| Trung bình |
|
|
|
| 11,0 | 15,2 |
|
| 9,9 | 18,0 |
- 1 Tiêu chuẩn quốc gia TCVN 2662:1978 về Nước uống - Phương pháp xác định hàm lượng amoniac
- 2 Tiêu chuẩn quốc gia TCVN 11478:2016 về Nước uống - Xác định dư lượng thuốc bảo vệ thực vật nhóm N-metylcarbamolyoxim và N-metylcarbamat - Phương pháp sắc ký lỏng
- 3 Tiêu chuẩn quốc gia TCVN 11479:2016 về Nước uống - Xác định dư lượng thuốc bảo vệ thực vật chứa nitơ và phospho - Phương pháp sắc ký khí
- 4 Tiêu chuẩn quốc gia TCVN 11481:2016 về Nước uống - Xác định dư lượng thuốc bảo vệ thực vật đã clo hóa trong môi trường axit - Phương pháp sắc ký khí
- 5 Tiêu chuẩn quốc gia TCVN 11492:2016 về Thực phẩm có nguồn gốc thực vật - Xác định glyphosate và axit aminomethylphosphonic (AMPA) - Phương pháp sắc ký khí
- 6 Tiêu chuẩn quốc gia TCVN 10988:2016 về Thuốc bảo vệ thực vật chứa hoạt chất fipronil - Yêu cầu kỹ thuật và phương pháp thử
- 7 Tiêu chuẩn Quốc gia TCVN 8050:2016 về Nguyên liệu và thành phẩm thuốc bảo vệ thực vật - Yêu cầu kỹ thuật và phương pháp thử
- 8 Tiêu chuẩn quốc gia TCVN 10979:2016 về Thuốc bảo vệ thực vật chứa hoạt chất Bensulfuron methyl - Yêu cầu kỹ thuật và phương pháp thử
- 9 Tiêu chuẩn quốc gia TCVN 10980:2016 về Thuốc bảo vệ thực vật chứa hoạt chất Iprodione - Yêu cầu kỹ thuật và phương pháp thử
- 10 Tiêu chuẩn quốc gia TCVN 12828:2019 về Nước giải khát
- 1 Quyết định 4189/QĐ-BKHCN năm 2016 công bố Tiêu chuẩn quốc gia do Bộ trưởng Bộ Khoa học và Công nghệ ban hành
- 2 Tiêu chuẩn quốc gia TCVN 2662:1978 về Nước uống - Phương pháp xác định hàm lượng amoniac
- 3 Tiêu chuẩn quốc gia TCVN 11478:2016 về Nước uống - Xác định dư lượng thuốc bảo vệ thực vật nhóm N-metylcarbamolyoxim và N-metylcarbamat - Phương pháp sắc ký lỏng
- 4 Tiêu chuẩn quốc gia TCVN 11479:2016 về Nước uống - Xác định dư lượng thuốc bảo vệ thực vật chứa nitơ và phospho - Phương pháp sắc ký khí
- 5 Tiêu chuẩn quốc gia TCVN 11481:2016 về Nước uống - Xác định dư lượng thuốc bảo vệ thực vật đã clo hóa trong môi trường axit - Phương pháp sắc ký khí
- 6 Tiêu chuẩn quốc gia TCVN 11492:2016 về Thực phẩm có nguồn gốc thực vật - Xác định glyphosate và axit aminomethylphosphonic (AMPA) - Phương pháp sắc ký khí
- 7 Tiêu chuẩn quốc gia TCVN 10988:2016 về Thuốc bảo vệ thực vật chứa hoạt chất fipronil - Yêu cầu kỹ thuật và phương pháp thử
- 8 Tiêu chuẩn Quốc gia TCVN 8050:2016 về Nguyên liệu và thành phẩm thuốc bảo vệ thực vật - Yêu cầu kỹ thuật và phương pháp thử
- 9 Tiêu chuẩn quốc gia TCVN 10979:2016 về Thuốc bảo vệ thực vật chứa hoạt chất Bensulfuron methyl - Yêu cầu kỹ thuật và phương pháp thử
- 10 Tiêu chuẩn quốc gia TCVN 10980:2016 về Thuốc bảo vệ thực vật chứa hoạt chất Iprodione - Yêu cầu kỹ thuật và phương pháp thử
- 11 Tiêu chuẩn quốc gia TCVN 12828:2019 về Nước giải khát